[分享] 肝舒乐片对乳腺增生病大鼠病理形态及血清性激素的影响(2)

本文原载于《中医研究》2008年第3期，授权环球中医网转载，未经许可，请勿转载。

1.5取材处理

造模结束，大鼠禁食24 h，称重、脱毛，各组根据体重按随机数字表法随机抽取9只大鼠，用游标卡尺测量大鼠左侧腋窝下第二对乳头的直径，随后摘取眼球取血5～6 mL，放置15 min 后，用低温离心机离心15 min，分离出血清，置冰箱内保存，用放射免疫法生殖激素4项测定。1～2 mL离心后，送血清做转氨酶测定，再用脱颈椎法处死所有大鼠，用打孔器取下左侧第二对完整乳房，直径约8 mm，测量乳房的直径、高度，称重后，用4％多聚甲醛固定，石蜡包埋切片，HE染色，在光镜下做组织学观察，同时每组切取一只大鼠左侧第三对完整乳房，4％戊二醛固定，磷酸缓冲液冲洗，固定后，置低温0～4℃冰箱冷藏保存，待送电镜观察。

1.6观察指标及方法

一般征象观察：包括毛色、饮食、精神状态、体重等。运用光学显微镜及电子透射镜观测各组大鼠乳腺组织病理形态的变化，运用放射免疫法测定各组大鼠血清激素含量变化

1．7统计学方法　

实验数据用（x±s）表示，两组间差别用t检验，用SPSS？？？软件进行统计学分析。　

2　 结  果　

2.1　大鼠一般情况

正常组：大鼠皮毛光泽，体态活泼，反应敏捷，食量、粪便均正常，体重增长正常，无死亡。模型组：大鼠竖毛，皮毛欠光泽，精神不振或烦躁不安易激惹，反应迟钝，食量减少与或亢进，粪便时稀软，身体严重消瘦或体重增长迅速，进食、排便、活动减少或增加，死亡2只。各用药组：大鼠皮毛尚可，除疏肝组身体略瘦外其余体形均接近正常组，饮食较正常，粪便正常，除健脾组活动较少外其余活动力均较强，常有打斗、咬啮饮水器瓶塞等，除疏肝组体重略轻外其余体重明显高于模型组，疏肝组死亡1只，其余各组均无死亡。

2．2光镜观察
　
大体观察可见，正常组大鼠乳房极小，肉眼几乎看不到，模型组大鼠乳头竖起、较坚实、充血，增高，乳房增大，镜下乳腺增生呈弥漫性，无局部包块，腺泡和小叶显著增加，脂肪和结缔组织明显减少，腺泡腔和腺导管腔明显扩张，腺泡腔内含分泌物及脱落的细胞；与模型组比较：肝舒乐片组和乳癖消组乳腺组织上述变化有显著改善；疏肝组、健脾组亦有所改善，但总体上与模型组基本相似。说明外源性雌激素的异常刺激可造成动物乳腺增生病理模型，其乳腺病理与人体乳腺增生病理相类似。

表1  各组大鼠乳房直径、高度、乳头直径及终极体重比较(x±s )
　



由表1，2可见，模型组乳腺组织增生性病变严重；与模型组比较，肝舒乐组乳腺体积明显减少，乳腺小叶数和腺泡数均显著减少；疏肝组、乳癖消组、健脾组乳腺体积亦明显减小，乳腺腺泡数亦显著减少；肝舒乐片组和疏肝组、健脾组 3个组和乳癖消组的腺泡腔均明显小于模型组。通过分析得出：①实验动物模型的主要病理变化是乳腺小叶体积显著增大，腺泡呈广泛弥散性增生，腺上皮细胞胞浆内有大量的脂质小滴的出现，与小叶间质的结缔组织和脂肪组织而减少的正常对照组有明显的差别，均有显著性差异(P＜0.05)，提示模型成功。②用药各组均有抑制乳腺小叶增生作用。但疗效不同，以肝舒乐片组和乳癖消组作用最佳。其次是疏肝组。最差的是健脾组，其作用是抑制乳腺小叶的增生和腺体的分泌，机理尚待进一步研究。

表3  各组大鼠乳腺组织增生程度结果


2.3 电镜观察

见表4

表4   肝舒乐片对大鼠乳腺增生组织

超微结构的影响(x±s)




通过电镜对大鼠乳腺组织的观察和立体计量学分析结果可得出：模型组：乳腺小叶腺细胞胞浆内的线粒体丰富，嵴排列整齐，从线粒体的比膜面测定可以看出，模型组最高，表明其线粒体ATP功能最强，产生能量最强，细胞代谢最旺盛，这也是乳腺小叶腺增生的主要依据。实验证明乳腺小叶腺增生与细胞能量代谢有着密切的关系，证明了增强乳腺细胞代谢引起乳腺小叶增生。用药组：乳腺腺上皮细胞内的线粒体数量和所占胞浆比例各组无显著差别(P＞0.05)；但细胞线粒体嵴的变化即嵴面积占线粒体体积(比膜面)各组间有显著差异(P＜0.05)。提示：肝舒乐片组抑制乳腺小叶增生的疗效最佳；其次为疏肝组和健脾组；乳癖消组亦有抑制作用，但疗效次于其它组。



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